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人胃癌细胞研究与尊龙凯时的突破性进展

发布时间:2025-03-28   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时提供的细胞培养条件如下:使用1640培养基,加入10%的FBS和1%的PS,适用于贴壁和悬浮细胞的生长,培养温度设定为37℃。在细胞传代方面,建议第一次传代的比例为1:2,每2天更换培养液,以保持细胞的健康状态。

人胃癌细胞研究与尊龙凯时的突破性进展

在购买尊龙凯时的细胞培养产品时,建议一起购买多件以享受更优的优惠。收到细胞后,应使用75%酒精对瓶身进行消毒,然后放置在超净台内进行无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时,以确保细胞适应环境。观察细胞的生长状态,并拍摄不同倍数的显微镜照片(推荐40x、100x、200x),前三天的照片是售后的重要依据。如未提供照片,将默认细胞状况良好。

细胞培养步骤

进行细胞传代时,如细胞汇合度未超过80%,请将培养液收集至离心管中,保留5ml,并放入37℃、5%CO2的孵箱中继续培养。当细胞密度超过80%时,便可进行传代。具体步骤如下:

贴壁细胞传代

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS洗涤细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,显微镜观察细胞状态,若细胞大部分变圆并脱落,迅速加5ml培养基终止消化。
3. 吹打细胞使其完全脱落后,吸出细胞悬液至15ml离心管中,1000RPM离心5分钟,弃去上清液,补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 将细胞悬液按1:2的比例分瓶传代(两个T25瓶),添加新的完全培养基至每瓶5-8ml,最后放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。

悬浮细胞传代

1. 使用半换液法,将培养瓶竖放于培养箱静置1小时,轻轻吸掉约3ml的培养基,然后补充3ml完全培养基。
2. 若培养基颜色变化慢,可直接添加500μl的FBS,对于传代时可直接补充5ml培养基,并分到两个培养瓶培养。重复3次后可进行离心传代,以去除死细胞。
3. 离心换液法:如需分瓶,将细胞悬液收集至离心管中,1000RPM离心5分钟,弃去上清,补加1-2ml培养液重悬,再按比例分瓶培养。

细胞冻存与复苏

在细胞生长至覆盖80%时,宜采取冻存措施。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,使用PBS清洗细胞一次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶约1ml,观察细胞变圆后加入5ml培养基终止消化,再轻吹使之完全脱落,转移至15ml离心管,1000RPM离心5分钟。
3. 弃去上清,加入无血清冻存液并混匀,放入冻存管中。
4. 将冻存管直接放入-80℃冰箱,待24小时后可转入液氮罐中保存。

细胞复苏时,从液氮中取出冻存管,迅速置于37℃水浴中解冻,完成后清洗外壁。将细胞移至含5ml完全培养基的离心管中,1000RPM离心5分钟,弃去上清液后重悬于完全培养基中,接种至T25培养瓶,并在37℃、5%CO2的培养箱中继续培养。第二天更换新的完全培养基。

请注意,运输过程中某些细胞可能会脱落,这是正常现象。如果脱落量较大,可以将培养液收集至离心管中,离心后加入胰酶消化,再重新培养。选择尊龙凯时,确保细胞培养的高效与安全!