本试剂盒仅限于科学研究用途,禁止用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
试剂盒操作步骤
将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,经过适当的温育和彻底洗涤后,使用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸的作用下变为最终的黄色。样品中adropin(AD)的浓度与颜色的深浅呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品的浓度。
试剂盒组成
尊龙凯时提供的试剂盒包含以下组成部分:
- 微孔酶标板:96孔配置(12孔×8条),48孔配置(12孔×4条)
- 标准品:0, 25, 50, 100, 200, 400 pg/mL
- 样本稀释液:6mL(96孔配置),3mL(48孔配置)
- 检测抗体-HRP:10mL(96孔配置),5mL(48孔配置)
- 洗涤缓冲液:25mL(96孔配置),15mL(48孔配置)
- 底物A和B:分别为6mL和3mL
- 终止液:6mL(96孔配置),3mL(48孔配置)
- 封板膜:2张
- 说明书:1份
- 自封袋:1个
样品收集及处理
针对不同样品类型,您需遵循以下步骤:
- 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,收集后3000转离心10分钟,分离血清和红细胞。
- 血浆:采用EDTA、柠檬酸或肝素抗凝,3000转离心30分钟后取上清。
- 细胞上清液:3000转离心10分钟以去除颗粒。
- 组织匀浆:将组织与生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
- 保存:若样品未及时检测,请分装后于-20℃冰冻保存,避免反复冻融,解冻时注意样品均匀。
操作设备需求
使用本试剂盒时需准备:
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
操作注意事项
- 试剂盒从冷藏中取出后需在室温平衡15-30分钟后使用,未用完的微孔需密封保存。
- 若洗涤液出现结晶,稀释时可加热帮助溶解;此过程不影响实验结果。
- 加样应使用加样器并保持其准确性,尽量在5分钟内完成加样,以避免误差。
- 进行每次测定时请做标准曲线,并进行复孔检测。
- 封板膜仅限一次性使用,以防止交叉污染。
- 操作应严格按照说明书进行,试验结果以酶标仪读数为准。
- 底物需避光保存,所有样品和废弃物应按传染处理。
- 不同批号的试剂盒成分不得混用。
温馨提示:尊龙凯时公司提供代测服务,购买本公司ELISA试剂盒的客户均可享受免费的代测服务,详情请咨询销售经理或在线客服。