菌种保藏（culture preservation，culture collection）是保持微生物菌株活力和遗传性状的关键技术，尤其在生物医疗研究中更显重要。经过基因编辑或改造的菌种通常非常珍贵且微量，因此需要进行妥善的保藏，以保证这些宝贵资源的长期有效性。以下将介绍具体的操作步骤。

菌种保藏操作步骤

首先，将待保存的菌液与配好的甘油混合液按1:1比例混合，确保最终达到20%的甘油浓度。需要先配置40%（v/v）甘油和灭菌水的混合液。然后，取一个2ml的离心管或保菌管，向其中加入500微升的40%甘油-水混合液。接着，使用移液枪吸取500微升的菌液，将枪头深入液面以下缓慢加入管中。最后，将离心管或保菌管放入-80℃的冰箱进行保存，并在保菌管上标明日期、菌种、抗性等详细信息，以方便日后识别。

菌液复苏

对于保存的菌液，可以进行后续的操作。主要步骤如下：取含有抗性的LB培养基，每个培养管装入约八毫升。在无菌操作台上进行所有操作，以防止污染。向每管加入100微升的菌液，并将其在37℃、180rpm摇动培养12小时。

氨苄抗性配置

氨苄抗性配置为：将1g氨苄青霉素钠溶解在10ml灭菌水中，过滤后保存在-20℃。同时，LB培养基的配置为：将10g氯化钠、10g胰蛋白胨和5g酵母提取物溶解在一升的体系中，并分装到250ml的锥形瓶，每瓶100ml。有关Amp抗性的处理，则是在100ml的培养基中加入100微升的氨苄抗性材料。

通过以上简单有效的步骤，您可以妥善保藏和复苏珍贵的菌种，为后续的生物医疗研究提供坚实的基础。选择尊龙凯时品牌，享受高品质的科研支持与设备，为您的研究保驾护航。