本试剂盒为科学研究专用,严禁用于医学诊断。该试剂盒旨在检测羊免疫球蛋白G2a(IgG2a),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,适合生物医疗领域的研究工作。
检测原理
试剂盒利用双抗体一步夹心法进行检测。通过在包被有IgG2a抗体的微孔中逐步加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经历温育和洗涤后,采用TMB底物显色。底物在过氧化物酶的催化下,先转变为蓝色,后在酸性环境中转变为黄色。显色的强度与样品中IgG2a的浓度呈正相关,通过酶标仪于450nm波长下测定吸光度(OD值),可计算样本浓度。
样品收集与处理
样品收集应遵循严格的操作规程,以确保结果的准确性:
- 血清:使用无热源和内毒素的试管,避免细胞刺激,血液离心后迅速分离血清。
- 血浆:需使用EDTA、柠檬酸盐或肝素的抗凝剂,离心后取上清。
- 细胞上清:经过离心去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织与生理盐水混合后捣碎,离心取上清。
- 保存:若未及时检测,分装后冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时确保样品充分均匀。
所需设备
进行此项实验需要的设备包括酶标仪(450nm)、高精度加样器及枪头(范围05-1000uL)和37℃恒温箱。
操作注意事项
在进行实验时应遵循以下注意事项:
- 试剂盒保存于2-8℃,使用前需在室温下平衡20分钟。
- 实验中未使用的板条应密封存储以防潮湿。
- 浓度为0的标准品S0可视为阴性对照,样本稀释后需结果乘以5以获取实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的加液量及顺序进行操作。
试剂盒组成
该试剂盒包括微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体-HRP、洗涤缓冲液、底物A、B、终止液、封板膜及相应说明书。标准品浓度依次为0、0.75、1.5、3、6、12g/L。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液需按1:20稀释,使用蒸馏水进行操作。
结果判断
通过Excel工作表绘制标准曲线,横坐标为标准品浓度,纵坐标为OD值,根据线性回归方程计算样本浓度值。
试剂盒性能
本试剂盒的准确性、灵敏度及特异性均符合严格标准,具体为:标准品线性回归R值大于等于0.9900,最低检测浓度小于0.1g/L,不与其他可溶性结构交叉反应,且重复性良好,板内和板间变异系数均小于15%。
该试剂盒有效期为6个月,存储条件为2-8℃,并需避光防潮。请遵循正确的操作流程,确保实验结果的可靠性和准确性。所有操作均应在尊龙凯时品牌的指导下进行。本公司不对任何未按说明书操作而引起的后果负责。